溴化乙錠(Ethidium bromide,EB)是應用早且成熟的核酸染料,并且由于其價格便宜、靈敏度高,早期被實驗者廣泛應用。但其分子量小,很輕易就能穿透細胞膜,屬于誘變劑,具有高致癌性,對人體潛在危害非常大。實驗者使用時需要謹慎再謹慎,另外,單獨的EB區占用了實驗室的大塊空間,廢膠、廢液的處理費時、費力又費錢,真是讓人又愛又恨。
GelRed(紅色)和GelGreen(綠色)是熒光染料領域頂級供應商Biotium廠家開發的高靈敏、低毒性和超安全的熒光核酸凝膠染色試劑。它可替代溴化乙錠(EB),并且靈敏度遠高于EB,同時不需要脫色處理。由于GelRed和EB有相同的光譜特性,因此用它替代EB時不需要更換成像系統。GelRed既可用于預制凝膠也可用于電泳后染色。通常電泳后染色的靈敏度更高,并能排除染料對DNA遷移的干擾 。使用 GelRed進行電泳后染色,操作簡單,不需要脫色和特殊溶液。只要將染料稀釋在0.1M NaCl 中,并將凝膠置于染色液中,30分鐘后就可以觀察。染色液在室溫下極為穩定,可以多次反GelRed&GelGreen,GelRed核酸染料,Biotium復使用。相比而言,預制凝膠由于不需要額外染色過程,因此染料用量更少,更為簡單經濟。
GelRed核酸染料的特點: Gelred其水溶染色劑通過美國環保局安全認定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環境污染。
主要優勢如下:
無 毒 性:GelRed獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,艾姆斯氏試驗結果也表明,該染料的誘變性遠小于EB。其水溶染色劑通過美國環保局安全認定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環境污染。
靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
穩定性高: 可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存。
信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
操作簡單:與EB一樣,在預制膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
適用范圍廣:適用于預制凝膠(膠染法)和凝膠電泳后染色(泡染法)。
與標準凝膠成像系統完美兼容 :使用 312nm 激發的UV凝膠成像系統時, GelRed可以完美的替代EB。
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